。使用基于图形的分类，t细胞被分成9个簇(图6c)，每个簇的功能状态根据它们的特征基因来确定(图6c和补充表2)。我们观察到效应t细胞簇(c5)显示细胞因子、效应分子(干扰素-γ和肿瘤坏死因子)和t细胞活化标志物(pdcd1和)表达增加，增殖t细胞簇(c9)显示颗粒酶和ki67表达，调节性t细胞簇(c8)显示foxp3和il2ra表达(图6c)。值得注意的是，与对照组(分别为和)相比，去杆状细胞(dt治疗)降低了效应器、增殖t细胞和treg细胞的比率((c5+c9)/c8)。总之，这些scrna-seq结果表明，rt激活的棒状细胞的存在有助于适应性抗肿瘤免疫，可能是通过限制hkp1肿瘤中髓系细胞介导的炎症。balf样本的elisa检测显示，与0gy对照组相比，4gy-rt显著降低了hkp1tme中il-1β、pge_2和tnf-α的水平(图6d)，但在没有棒状细胞(dt处理的scgb1a1cre/idtr)或其分泌体(scgb1a1cre/snap23fl/fl)的情况下，4gy-rt未能减少这些炎症因子(图6d)。为了证明rt诱导的棒状细胞分泌体的临床相关性，我们在ii期新辅助临床试验(nct02904954)54中评估了接受rt联合icis(抗pd-l1)治疗的nsclc患者的血浆水平。分别于首次立体定向全身放射治疗(sbrt)前1d和末次sbrt后1d采集血浆。匹配患者的cc10血浆浓度比较(放疗前和放疗后)显示，大多数获得病理改善的患者在放疗后血浆cc10水平升高(8人中有5人)，而无反应的患者(9人中有0人，p=)(图6e)，表明棒状细胞激活与联合治疗的病理反应有关。综上所述，这些发现表明，rt激活的棒状细胞通过其分泌体抑制了hkp1肺中的肿瘤前炎症，从而增强了适应性抗肿瘤免疫。

棒状细胞因子改善pd-1受体阻滞剂的疗效

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这些体外研究结果促使我们研究棒状鸡尾酒是否能反映4gy-rt在改善体内pd-1阻断方面的效果。我们每天给hkp1小鼠鼻内注射棒状鸡尾酒(每只小鼠每只蛋白20ng)，连续3d(第11-13天)，并联合pd-1抗体(图8a)。值得注意的是，与模拟对照相比，联合pd-1抗体的棒状鸡尾酒治疗可显著控制肿瘤并提高hkp1小鼠的存活率(图8b，c)。与4gy-rt相似，支气管肺泡灌洗液分析显示，与对照组相比，棒状鸡